Jurnal Praktikum Kimia Organik 1 - Percobaan 8

JURNAL PRAKTIKUM
KIMIA ORGANIK I

DISUSUN OLEH :

RAHMADANSAH

(NIM : A1C118066)

DOSEN PENGAMPU:

Dr. Drs. SYAMSURIZAL.,M.Si

       PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

 2020

PERCOBAAN 8

  I. Judul                      : Kromatografi Lapis Tipis dan Kolom

 II. Hari/Tanggal         : Rabu/29 April 2020

III. Tujuan                   : Adapun Tujuan dari percobaan kali ini adalah

1. Dapat mengetahui teknik-teknik dasar kromatografi lapis tipis dan        

    kolom.

2. Dapat membuat pelat kromatografi lapis tipis dan kolom kromatografi.

3. Dapat memisahkan suatu senyawa dari campurannya dengan

   kromatografi lapis tipis dan memurnikannya dengan kolom.

4. Dapat memisahkan pigmen tumbuhan dengan cara kromatografi kolom.

IV. Landasan Teori

Hal yang berprinsipkan atas dasar memisahkan suatu campuran senyawa dari komponen komponen dari suatu perbedaan kecepatan komponen dari masing masing fasa, dimana fasa nya itu adalah fasa diam dan fasa gerak dinamai Kromatografi. Terapat 3 jenis Kromatografi, yaitu berupa Kromatografi kolom, Kromatografi kertas dan Kromatografi lapis tipis (KLT). Punya suatu keuntungan dari pemakaian Kromatografi diantaranya:
1.) Proses yang dimiliki Kromatografi yaitu sederhana dan murah.
2.) Punya kemampuan fleksibilitas yang besar dalam keadaan fase gerak disebut KIT.
3.) Proses penyerapan kapasitas yang besar dibandingkan Kromatografi lain, yaitu KLT.
4.) Sangat mudah nya dideteksi suatu sampel menggunakan Kromatografi (Underwood,2006:407).
      KLT (Kromatografi Lapis Tipis) punya prinsip persis Kromatografi kertas pada cara melakukannya, pembeda nya itu adalah dari media Pemisahannya. Lapisan tipis adsorben akan disangga oleh papan kaca. Plastik atau aluminium berfungsi sebagai pengganti kertas. Lapisan tipis adsorben dapat berlakuan pada fasa diam. Ukuran 5-50 serbuk halus akan terbentuk akan fasa diam pada KIT pada adsorben. Zat pengikat pada energi Gibbs contohnya seperti barium sulfat, kanji (polivinil alkohol) untuk perlekatan lapis tipis penyangganya (Soebagio,2003:27).
      Pada Kromatografi lapis tipis terdapat lempeng gelas atau alumina yanh terlapisi oleh alumina, silika gel atau serbuk lainnya. KLT lebih sering dipakai dalam pemisahan dengan Kromatografi, dibandingkan dengan Kromatografi jenis lainnya. Dalam keadaan fraksi, cara pemisahan yang digunakan lebih sering adalah Kromatografi kolom. Fraksi disini akan membentuk senyawa yang lebih murni (Hart,2008:153).
      Adanya interaksi dalam fase diam dimana terjadi perbedaan waktu retensi (TR) dengan terpisahnya dari  suatu analitik, merupakanmpenen fase diam (stationary phase). Bentuk yang ditemukan dalam fase diam adalah bahan atau porous (berpori) yang terlapiskan oleh padatan pendukung yang terbentuk dari molekuk cair atau kecil. fase gerak (mobile phase) fase yang bersifat inert melakukan kegiatan dengan analit. Bentuk yang dapat ditemukan oleh fase gerak bukan saja bentuk cair tapi berupa gas inert yang dapat digunakan dengan carner gas (Volatile) yang mudah menguap. Dalam Kromatografi akan ada kecenderungan molekul ataupun komponen melakukan hal pelarutan dalam cairan (Denkrisna,2010:253).
      Kegiatan menghitung serta membandingkan Harga Rf (Retardation factor) dapat dirumuskan dengan jarak yang ditempuh senyawa dibagi dengan jarak garis depan pelarut. Jika hal ini dijaga seperti kemurnian pelarut, penjenuhan atmosfer dan temperatur, sehingga menyebabkan faktor faktor dibawah ini:
a.) Kahadiran ion lain
b.) Waktu Praktikum pada uji sepotong kertas
c.) Keasaman yang dimiliki larutan aslinya
d.) Terdapat kation kation lain dengan konsentrasinya (Svehla,2007:536).
      Dalam menganalisis suatu komponen penyusun dari suatu sampel digunakan sebuah teknik pemisahan analisis kimia yang disebut Kromatografi. Hasil Kromatografi ini bisa dianalisis dengan menyeluruh. Ada beberapa contoh Kromatografi itu ialah Kromatografi uap, Kromatografi cair, Kromatografi lapis tipis, Kromatografi cair, Kromatografi atinitas, dan Kromatografi penukar ion. Prinsip kerja yang diberikan sama untuk semua Kromatografi. Adanya perbedaan gaya adesi (afinitas) pada fase gerak dan fase diam mengakibatkan sampel dan penguji sampel berpisah (tidak bercampur), makin besar daya adsorpsi pada fase diam dianalit akan mempengaruhi nilai afinitas nya. Analit yang punya nilai kuat adsorpsi nya dan Kelarutan kecil pada fase gerak maka waktu tinggalnya dalam kolom lebih lama begitu sebaliknya (http://syamsurizal.staff.unja.ac.id/2019/04/10/325teknik-pemisahan-dengan-khromatografi/).

V. Alat dab Bahan

5.1 Alat

·         Pelat Kaca Kecil

·         Oven

·         Gelas Piala

·         Batang Pengaduk

·         Cawan Petri

·         Tabung Reaksi

·         Pipa Gelas Kapiler

·         Bejana Pengembang

·         Lumpang

·         Rotary Evaporator

·         Pipet Tetes

·         Glass Wool   

5.2 Bahan

·         Metanol

·         Silika Gel

·         Aquades

·         Asam Asetat

·         Eter

·         Benzena

·         Kafein

·         Kristal Iod

·         Petrolium Eter

·         Kristal Na-sulfat Anhidrat

·         Selulosa

·         Kalsium Karbonat

·         Sukrosa

·         Aseton

·         Kertas Saring
 

VI. Prosedur Kerja

6.1 Kromatografi Lapis Tipis

1.  Disiapkan Plat TLC

2.  Dibuat larutan pengembang dalam gelas piala 1L  dengan komposisi Etanol : Metanol : Kloroform : Etil- Asetat : n-heksan : Aseton ( 40 : 68 : 108 : 115 : 140 : 152 ) ml

3.  Dibuat 10 larutan sampel daari 10 ekstrak tanaman dengan 5 ml metanol

4. Masing- masing diambil larutan sampel yang sudah di ekstrak dibubuhkan ( ditotolkan ) diatas pelat TLC dengan jarak kira-kira 1cm dari tepi pelat kaca.

5.  Dikeringkan noda sampel dan standard dengan dryer (ditiup)

6.  Dimasukkan pelat ke dalam bejana pengembang

7.  Dibiarkan proses ini berlangsung sampai garis mencapai 1 cm dari tepi atas pelat

8.  Diangkat pelat dari bejana, lihat noda dengan lampu UV atau dibuat larutan dengan serium sulfat

9.  Dihitung dan bandingkan semua Rf yang diperoleh.

6.2 Kromatografi Kolom

1.      Disiapkan 10 ekstrak daun

2.      Disiapkan kolom kromatografi

3.      Disumbat bagian bawah kolom dengan glass wool

4.      Dimasukkan silika gel kedalam larutan pengembang yang telah dibuat di awal

5.      Larutan tersebur kemudian dimasukkan kedalam kromatografi kolom

6.      Dimasukkan sampel yang akan di kromatografi

7.      Pelarut harus terus-menerus diteteskan kedalam kolom

8.      Tetesan yang keluar dari kolom ditampung dengan beberapa tabung reaksi bersih dan dipisahkan berdasarkan warnanya.

Link Video Praktikum dari kromatografi lapis tipis: https://youtu.be/OZKuZ_w2Fg0

Link Video Praktikum dari kromatografi kolom: https://youtu.be/HenPngg7-ig

Permasalahan:

1. Berdasarkan video Kromatografi lapis tipis (KLT), Bagaimana proses terbentuknya noda pada sampel ekstraksi tanaman ketika dicelupkan kedalam salah satu eluen, jelaskan dengan reaksi kimia yang terjadi?
2. Berdasarkan video Kromatografi lapis tipis (KLT), setelah terbentuk noda di plat KLT kemudian disinari oleh sinar UV, dimana fungsi sinar UV disebutkan adalah untuk lebih menampakkan lagi noda yang terbentuk. Coba jelaskan proses penyinaran sinar UV pada plat KLT agar noda tersebut lebih nampak lagi?
3. Berdasarkan video Kromatografi Kolom, Coba jelaskan perbedaan afinitas atau gaya adesi yang seperti apa menyebabkan sampel ekstraksi daun katuk dan silika gel berpisah?